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      1. 常見問題

        常見問題
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        HPLC肽圖檢查法,胰酶的自切峰會不會出現在肽譜圖上? 2023-05-17 胰酶的使用量是蛋白質的1/50,在質譜上基本不會對蛋白質的肽段峰產生影響。
        全序列檢測適用多少氨基酸的小肽? 2023-05-17 適用于800-4000Da左右的小肽,太長的序列用MALDI-TOF的方法二級可能碎裂不太完全。
        HPLC質量肽圖,同一肽段出現不同的洗脫時間? 2023-05-17 出現不同的洗脫時間,可能由于肽段有異構化現象,分子量一樣,但是極性不同,所以會出現洗脫時間有一定的差異。另外有些可能是由于肽段的豐度較高,洗脫時間過長,出現一定的拖尾現象。
        是否所有蛋白質都適合質譜法C端測序? 2023-05-17 不是所有的蛋白質都能進行質譜法C端測序,首先要有理論序列。其次,有些蛋白沒有合適的酶來切到合適的片段,切到的肽段太大(25個氨基酸以上)或太短(7個氨基酸以下),都不太適合質譜檢測,那么找到C端肽段的機會會很小。
        硫鍵檢測不到的原因? 2023-05-17 1. 樣品中的理論配對方式的可能含量很低,或者酶切之后的肽段量低于質譜檢測線,所以無法被質譜檢測器檢測到。 2. 樣品中存在理論配對方式不符的狀況,無法和理論的配對方式進行匹配。 3. 質譜檢測對肽段分子量大小有限制。一般M/Z比值在300-1800之間,且容易被離子化的片斷才能被檢測到。所以某些酶切之后肽段過小或者過大,或者肽段離子化效率很低,質譜無法進行檢測。
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